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ELISA试剂盒实验室无菌操作注意事项
点击次数:605      发布时间:2020-11-24

1.ELISA试剂盒玻璃器皿的消毒和清洁

新购玻璃器皿的处理新购玻璃器皿应用热番笕水洗刷,流水冲刷,再用1%~2%盐酸溶液浸泡,以除去游离碱,再用水冲刷。对容量较大的器皿如试剂瓶、烧瓶或量具等,经清水洗净后应注入浓盐酸少量,渐渐转动,使盐酸布满容器内壁数分钟后倾出盐酸,再用水冲刷。
 

2.污染玻璃器皿的处理

①一般试管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡,再煮沸30分钟,亦可用番笕或合成洗刷剂洗刷使尽量发生泡沫,然后用清水冲刷至无番笕停止。然后用少量蒸馏水冲刷。

②细菌培育用的试管和培育皿可先行集中,用1kg/cm2高压灭菌15~30分钟,再用热水洗刷后,用番笕洗刷,流水冲刷。

③吸管运用后应集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小时,逐支用流水反复冲刷,再用蒸馏水冲刷。

④油蜡沾污的器皿,应单独灭菌洗刷,先将沾有油污的物质弃去,倒置于吸水纸上,100℃烘干半小时,再用碱水煮沸,番笕洗刷,流水冲刷。必要时可用二jia苯祛污。

⑤染料沾污的器皿,可先用水冲刷,后用清洁或稀盐酸洗脱染料,再用清水冲刷。一般染色剂呈碱性,所以不宜用番笕的碱水洗刷。

⑥玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡,取出后流水冲刷,再用番笕或弱碱性煮沸,天然冷却后,流水冲刷。被结核杆菌污染或不易洗净的玻片,可置于清洁液内浸泡后再冲刷。
 

3.无菌器材和液体的准备

将玻璃用具中的培育皿、培育瓶、试管、吸管等按上述办法洗净烘干后,用一洁净纸包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花,装入干净的铝盒或铁盒中,于120℃的干燥箱中干燥灭菌2小时,取出备用。关于手术器械、瓶塞、工作服以及新制造的PBS洗液,则采用高压蒸气灭菌法,即在15磅的条件下,加热20分钟。而关于MEM培育液、小牛血清和消化液等需用G5或G6滤器负压抽滤后运用。
 

4.在无菌操作过程中,重要的是要坚持工作区的无菌、清洁。

因而,在操作前20~30分钟要先发动超净台和紫外灯,并认真洗手和消毒。在操作时,严禁喧闹,严禁用手直接拿无菌物品,如瓶塞等,而必须用消毒的止血钳、镊子等。培育瓶应在超净台内操作,并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。关于吸管应先用手拿后1/3处,戴上胶皮乳头,并用酒精灯烧烤之后再吸液体。
 

5.常用清洁液的制造法

①重铬suan钾清洁液:可根据不同需要,选用下列的任何一种浓度。先将重铬suan钾溶于水中,再渐渐参加浓硫酸。留意,此时可发生高热,应避免容器决裂。重铬suan钾清洁液除污力强,腐蚀性大,应避免触摸皮肤和衣服。为避免吸取空气的水分而变质,此液应储存于带盖的容器中。如清洁效能较差,可再参加少量重铬suan钾及浓硫酸,还可继续运用。直到液体变蓝绿色,即不能再用。制造重铬suan钾清洁液时,宜用耐高温的陶瓷缸或耐酸珐琅或塑料容器。运用玻璃器皿时,应特别留意避免发生高热而决裂,切忌用量筒来制造。

②磷酸三钠将其配成5%~10%水溶液,可用于洗刷玻璃器皿上的油污,但经常运用腐蚀玻璃,使器皿表面含糊、毛糙。
 

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