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其受体及细胞因子的生物学测定法
点击次数:1162      发布时间:2016-06-08

很多细胞因子针对转化的细胞及病毒感染的细胞具有溶细胞或抑制细胞生长的活性。常用的检测细胞增殖的方法有3H-TdR掺人法、比色法、染色法和直接计数法等。检测细胞因子促生长活性或抑制生长活性是将不同稀释度的待测样品或细胞因子标准品与培养的细胞株共同培养一定时间,然后检测增殖的细胞数。此外,测定代谢产物荧光强度的方法也可检测增殖细胞数,如ATP法和cAMP法。检测细胞因子溶细胞八田胞毒活性或抑制生长活性是将不同稀释度的待测样品或细胞因子标准品与培养的细胞株共同培养一定时间,然后检测存活的靶细胞数,酶联免疫试剂盒并与对照比较求得溶细胞或抑制细胞生长的百分率,或以OD值对样品稀释度作图,绘制标准品的剂量反应曲线,从曲线上求得相应的待测样品的含量。生物学活性检测法所用的靶细胞可直接从组织中分离,如骨髓细胞的集落形成试验和胸腺细胞(脾细胞)的增殖试验,或用体外培养的依赖细胞因子才能生长的细胞因子依赖株及对细胞因子杀伤敏感的细胞作为靶细胞。细胞因子还能诱导靶细胞表达某些表面分子或分泌一些蛋白质,可以用荧光素标记抗体检测表达相应分子的细胞数,或用特定方法测定细胞分泌的蛋白质,间接了解细胞因子的活性。
为了模仿拥挤的细胞内环境,酶联免疫试剂盒研究人员用了多种不同数量的聚合物,以检测它们在不同密度水平下的效果。结果发现,密集的环境使基因转录变得对环境缺乏敏感。当他们改变镁、铵和亚精胺(一种能调节大分子稳定性和结合能力的化学物质)的密度时,低密度环境下基因表达的扰动变化比在高密度环境下更大。
    论文中指出,该研究证明大分子聚集会把生物线路和人造细胞纳米系统中的细胞成分结合在一起,从而增加了基因表达的稳定性。酶联免疫试剂盒研究人员认为,这些发现有助于理解细胞是如何适应分子聚集现象的,哪些是进化过程中保留下来的,而这些理解可能引导合成生物学家将来开发出人造细胞,用于药物递送、生物燃料生产和生物传感器等。

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